일반기술
생명과학 > 식물자원
본 기술은 은행엽에서 주된 유효 성분인 글리코람노사이드 쿠마릭에스터 화합물과 퀘세틴 글리코람노사이드 쿠마릭에스터 화합물을 분리 정제하는 방법이다.은행엽에서 추출된 엑기스는 노인성 치매, 뇌혈관 및 말초혈관 혈류장애치료약으로 사용되고 있으며 그 주요활성 성분은 플라보노이드로 알려져 있다. 본 기술은 은행엽을 추출하고 농축한 후 혼합 수용액에 용해시키는 단계, 생성된 침전물을 여과하고 여액을 비극성 용매로 분리, pH 조절하는 단계 및 이를 다시 혼합 용매등으로 추출, 분리, 농축, 건조, 재결정하는 단계를 통하여 플라본 글리코람노사이드 쿠마릭에스터 화합물을 얻는방법을 포함하고 있다.특히 플라보노이드류 중에서 질환 치료에 가장 중요한 활성 물질은 플라본 글리코사이드류이며, 이 중 주요 유효 성분인 캄프페롤 글리코람노사이드 쿠마릭에스터화합물 및 퀘세틴 글리코람노사이드 쿠마릭에스터 화합물을 동시에 고농도로 각각 분리 및 정제함으로써 은행엽엑기스의 표준물질 및 새로운 의약품으로 개발 가능한 생리 활성 물질을 대량생산할 수 있다본 기술은 혈류장애치료제로 사용되는 플라본 글리코람노사이드 쿠마릭에스터 화합물을 은행엽 엑기스로부터 분리 정제하는 방법에 특징이 있다.본 기술에 따른 분리 정제 단계는 아래와 같다.1.은행엽엑기스 수용액을 유기용매로 추출하여 플라본 글리코람노사이드 쿠마릭에스터를 분리 정제함에 있어서, 유기용매로 추출하기 전에 pH를 7내지 9의 범위가 되도록 조절하고,2. 유기 용매로 추출하여 플라본 글리코람노사이드 쿠마릭에스터 혼합분말을 얻은 다음, 저급 알콜에 녹인 후3. 클로로포름-에테르 혼합용매에 적가하고 여과하여 정제된 혼합분말을 얻고, 실리카겔 칼럼으로 분리 정제,4. 다시 메틸아세테이트-메틸에틸케톤-개미산-물의 혼합용매로 분리5. 캄프페롤 글리코람노사이드 쿠마릭에스터 화합물과 퀘세틴 글리코람노사이드 쿠마릭 에스터 화합물을 각각 분리 정제한 다음,6. 각각을 2차 증류수로 가온하여 녹인후 0-20도에서 방치하여 재결정하여 얻는다. 이렇게하여 분리 정제된 엑기스는 노인성 치매, 뇌혈관 및 말초혈관 혈류장애치료약으로 사용된다.
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2001-04-02
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일반기술
생명과학 > 식물자원
본 기술은 부자류의 독성을 감소시키는 수치방법에 관한 것으로서 건조 부자 또는 천오를 마이크로파로 처리하므로서 짧은 시간내에 아코니틴계 알카로이드를 가수분해시켜 부자류의 독성을 감소시키는 방법에 관한 것이다.부자(Oriental Aconiti tuber)는 중국원산인 미나리 아재비과의 아코니툼 카르미차엘리 데비욱스(Aconitum Carmichaeli Debeaux, Ranonculaceae) 및 그 동속식물의 괴근으로서 예로부터 한방에서 강심, 이뇨, 신진대사촉진 및 기능항진, 진통제 등으로 널리 쓰여온 생약이다.아코니튬속 식물은 자연그대로 약용으로 사용하면 강한 독성을 나타내므로 약용으로 사용하기 위해서는 장시간 염수에 침적하거나 가열처리하는 등의 수치 과정을 거쳐 독성을 감소시킨 염부자 또는 포부자등이 사용되어 왔다. 그러나 종래의 가열 방법은 열판 또는 오븐에서의 처리시간이 3~8시간이나 소요되고, 고압반응으로 인한 작업 위험성이 매우 크며 일련의 공정이 번거로운 문제등이 있었다.본 기술에서는 종래 고온, 고압하에서 처리하는 방법에 비하여 고압반응의 위험성이 없고, 보다 간편한 방법으로 부자괴근을 전자오븐에서 마이크로파로 처리함으로서 짧은 시간에 부자류의 독성을 감소시켰다.부자의 수치를 감소시키 위해 분말상태의 건조부자를 증류수에 침적시킨다음 5~15분 동안 마이크로파 처리하였고 이와 같은수치방법은 매우 짧은 시간에 간단한 방법을 통하여 부자의 독성을 감소시켰으며 그 수치 상태도 매우 양호하여 각종 한방 약재로 널리 이용될 수 있다본 기술은 부자의 독성을 감소시키는 방법에 있어서, 분말상태의 건조부자 또는 천오를 증류수에 침적한 다음 5~15분 동안 마이크로파 처리하는 것을 특징으로 한다.증류수 침적은 10~20시간 동안 시행하며 마이크로파의 파장은 약 2450MHz이다.수치과정을 거치지 않은 건조부자는 맹독성 알카로이드 성분이 각 98.6 및 162.9 마이크로그람/그람으로 상당히 많은 양을 함유하였고, 본 기술에 따라 전자오븐에서 5분~15분 처리하였을때는 39.3 및 73.2 마이크로그람/그람으로 저하되었다. 따라서 본 기술의 마이크로파를 이용한 방법은 위험성이 없고, 보다 간편한 방법으로, 부자의 독성을 감소시켰으며 그 수치 상태도 매우 양호하여 각종 한방 약재로 널리 이용될 수 있다
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2001-04-02
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일반기술
생명과학 > 식물자원
본 기술은 한약재로 사용되는 포공영(일명 황화지정)으로부터 항균활성이 높은 엑기스를 추출 정제하는 방법에 관한 것이다.포공영은 국화과 식물의 전초로서 포공영을 탕제로 사용할 경우 동의보감, 중약대사전 등에 나타난 한의학적 약리작용으로는 청열해독, 이담, 이뇨, 급성유선염, 결막염, 기관지염 등의 염증 치료, 항진균 효과, 건위작용, 항균 효과가 있는 것으로 알려져 있고, 현대 의학에서도 수용성 추출물을 분리, 정제하여 이뇨제로 이용되고 있으며, 인체에 대한 독성이 없어 전초를 동결 후 분말화시켜 건강식품으로 이용하고 있다.본 기술의 추출, 정제 방법은 다음과 같다.마쇄한 포공영 건조 분말을 추출기에 넣고 여기에 비극성 용매인 헥산 또는 사이클로헥산을 가하고 60도에서 6시간 교반 후 여과하여 포공영 잔체를 얻는다. 이 잔체를 추출기에 넣고 70~100%의 저급알콜 3~5리터를 가한 다음 50도에서 6시간 교반, 추출한다. 추출이 끝난뒤 여과하여 그 여액에 무기염류를 가하여 수소이온농도를 중성으로 조정한 후 농축한다. 여기에 할로겐 화합물 또는 저급케톤과 증류수를 가하여 층분리한 수용성 추출물을 얻는다. 다시 감압 농축하여 유기용매를 제거하고 수소이온농도를 3~5로 조정한 후 유기용매층을 수집하고 감압 농축한 후 조엑기스를 얻는다. 얻어진 조엑기스에 메탄올 수용액을 가하고 수소이온을 5~7로 조정, 할로겐 화합물 또는 저급케톤으로 층분리, 감압 농축하여 항균활성이 있는 포공영 엑기스를 얻었다.본 기술에서는 생약인 포공영으로부터 항균활성이 높은 엑기스를 추출, 정제함에 있어 공업적으로 경제성을 높이기 위하여 메탄올, 에틸아세테이트 등과 같은 저렴한 가격의 용매를 이용하였을 뿐만 아니라 정제과정 중 유기 용매만을 사용하는, 아주 효율적이고 간단한 방법을 개발하였고, 이러한 방법으로 얻어진 엑기스의 in vivo 실험을 통하여 항균활성을 입증하고 급성 독성 실험을 통하여 본 엑기스가 인체독성이 없음을 입증하였다본 기술은 포공영으로부터 항균활성이 있는 엑기스를 추출, 정제함에 있어서, 마쇄한 포공영 건조 분말에 비극성 용매를 사용하여 지용분을 제거하고 남은 식물잔체를 80~100% 저급알콜을 가하여 교반 추출한 다음 수소이온농도를 중성으로 조정한 후 농축하고, 여기에 할로겐 화합물 또는 저급케톤과 증류수를 가하여 층분리한 다음 식물 색소와 지용성분이 제거된 수용액 추출물을 분리하고, 그 수용성 추출액의 수소이온 농도를 3~5로 조정하고 저급아세테이트 또는 부탄올을 가하여 층분리한 후 유기용매층을 분리하여 감압농축하여 조엑기스를 정제하고, 그 조엑기스에 10~20%의 저급알콜수용액을 가하고 수소이온농도를 5~7로 조정한 다음 할로겐 화합물 또는 저급케톤을 가하여 층분리한 후 수용층을 분리, 감압 농축하여 항균활성이 높은 포공영엑기스를 정제하는 것을 특징으로 한다.본 기술은 포공영으로부터 인체에 독성이 없는 항균활성 물질을 추출, 정제함에 있어, 저렴한 유기 용매만을 사용하여 간단하면서도 경제적인 방법을 사용하였다.
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2001-04-02
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일반기술
생명과학 > 식물자원
본 기술은 일반적으로 햇빛을 차단하고 재배하는 종래의 콩나물과는 달리, 빛의 파장별 색광을 이용하여 생장시키는 콩나물 재배방법에 관한 것으로 농약이나 비료를 전혀 사용하지 않고 영양가가 높은 맛있는 콩나물을 속성재배한 녹색영양콩나물 및 그 재배방법에 관한 것이다.녹색영양콩나물 및 그 재배방법은 블랙하우스에서 콩나물 콩에 급수하면서 18 내지 22 시간 동안 발아를 시키는 단계, 블루하우스에서 급수하면서 22 시간 내지 26 시간 정도 줄기를 발육시키는 단계, 그린하우스에서 급수하면서 44 내지 52 시간 동안 줄기를 발육시키면서 광합성 작용에 필요한 엽록소를 생산하는 단계, 광합성 작용이 활발하도록 레드하우스에서 급수하면서 10 내지 14 시간 동안 발육시킨 후 다시 10 내지 14 시간 정도 급수량을 줄여 콩나물의 뿌리를 성장시키는 단계로 구성된다.이와 같은 녹색영양콩나물의 재배방법은 콩나물이 이틀정도 빨리 재배되므로 빠른 기간 내에 콩나물을 생산하게 되어 인력 및 비용을 절감할 수 있을 뿐만 아니라, 수확량이 증가하는 효과를 갖는다.또한 단색광을 이용하여 블랙하우스, 블루하우스, 그린하우스, 레드하우스를 설치한 후 재배단계를 컨베어 벨트와 같이 실시하여 자동적으로 색광의 투과량 및 시간에 맞게 설정하면 자동화와 더불어 대량생산을 할 수 있을 뿐만 아니라, 보다 효과적으로 재배할 수 있다종래의 황색콩나물은 암실에서 기르기 때문에 콩이 지니고 있는 영양소가 대부분 분해되고 소모된 상태로 새로운 영양소를 생산하지 못하지만 본 기술의 녹색영양콩나물은 빛을 받고 자라기 때문에 광합성으로 생산된 영양소를 많이 함유하므로 태양에너지를 지닌 영양식품이자 생리활성 기능이 뛰어난 약용 식품이다.본 기술에서는 빛의 파장별 색광을 이용하여 생장시키는 방법으로 재배하였으며 이렇게 재배된 녹색영양콩나물은 줄기의 섬유량이 높지만 질기지 않고 연해서 먹기에 좋을 뿐만 아니라 각종 영양소가 풍부하다. 단백질 뿐만 아니라 비타민 B1이 37.8배, B2가 28.8배, C가 22.4배나 많이 함유되어 있으며 숙취해소에 효과가 있는 아스파라긴산이 5.3배 이상 높은 수치를 보여주고 있다. 또한 항암 물질 아이소플라본이 무려 50배 이상 높은 함량을 보이고 있어 녹색영양콩나물을 음료 및 약용 식품으로 이용할 경우 국내 및 전세계적으로도 큰 시장을 형성할 것으로 기대된다
- 보유기관
- 한국산업기술진흥원
- 등록일
- 2001-03-31
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일반기술
생명과학 > 기타 생물자원 보존·생산·이용 기술
용매를 사용하여 식물체로부터 주목(Taxus cuspiadata)의 수피 또는 은행나무로부터 대사물질을 추출하고, 추출물 용액에 물을 가한 후 흡착제를 첨가하여 대사물질을 흡착시키고, 흡착제에 대해 초임계 유체로 이산화탄소를 사용하고 보조용매로 메탄올을 사용하여 100∼600 기압의 압력 및 40∼120 ℃의 온도에서 추출한다.식물체 대사물질의 초임계 유체 추출시 전처리 공정으로 흡착 공정을 추가하여 대상물질 외에 문제가 되는 비극성 물질인 지질 계열의 화합물들을 미리 제거함으로써 수율 및 선택도를 향상시켜 목적하는 식물체 대사 물질을 효과적으로 추출할 수 있다.유용하게 사용되는 대표적인 식물체의 대사물질로는 주목에서 추출되는 탁솔(taxol), 은행나무에서 추출되는 캠페롤(kampferol) 및 퀄세틴(quercetin) 등이 있다. 탁솔은 전통적인 용매 추출법에 의해 생산되고 있는데, 이 방법은 불필요한 물질들까지 모두 추출해낸 후 미량의 탁솔만을 정제해야 하기 때문에 많은 시간과 비용이 소요된다. 캠페롤과 퀄세틴도 전통적인 용매 추출법으로 생산되어 유해한 유기용매가 최종 생산물에까지 잔존하는 경우가 있다. 이러한 시간과 경비 면의 단점을 개선하기 위한 일환으로 초임계 유체 추출범이 개발되었으나, 수율이 크게 낮은 단점이 있다.기존의 추출법이 갖는 문제점을 해결하기 위하여 식물체 대사물질의 초임계 유체 추출시 전처리 공정으로 흡착 공정을 추가하여 대상물질 외에 문제가 되는 비극성 물질인 지질 계열의 화합물들을 미리 제거함으로써 수율 및 선택도를 향상시켜 목적하는 식물체 대사 물질을 효과적으로 추출할 수 있다
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2001-05-18
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일반기술
생명과학 > 미생물자원
광생물반응기는 미생물 배양액을 담을 수 있는 챔버를 형성하는 외부재킷; 외부재킷 내에 설치되어 배양액의 순환로를 형성하는 상하단이 개방된 수직원통형상의 투명한 내부도관; 내부도관의 하단부와 소통하여 공기나 다른 기체를 상향 공급함으로써 상기 내부도관 내부에서 배양액의 상향유동을 야기하는 폭기장치; 및 내부도관의 내면 또는 외면에 상기 배양액의 순환을 방해하지 않도록 설치되어 배양액의 전면에 빛에너지를 조사하는 하나 이상의 발광체로 이루어져 있다. 기존의 공기부양식 생물반응기에서 내부도관의 내부로 상향 주입되는 공기나 다른 기체가 배양액을 상향유동시킨 후 내부도관의 외벽을 따라 하향유동하게 함으로써 별도의 교반기 없이도 배양액의 순환이 가능할 뿐만 아니라 발광체를 투명한 내부 도관의 내면 또는 외면에 도입하여 순환하는 배양액 내부로의 빛투과 거리를 최소화하기 때문에 빛에너지가 배양액의 최대 표면적에 전달될 수 있어서 고농도로 광합성 미생물을 배양할 수 있다광합성 미생물(시아노박테리아나 조류)을 배양하는 방법은 옥외배양법과 광생물반응기를 이용하는 방법이 있는데, 옥외배양법의 경우의 예는 연못이나 외륜(paddle wheel) 형태로 배지를 순환시키는 수로(raceway) 형태인데 설치비나 운영비는 적게 들지만 고농도의 배양은 어려우며 다른 미생물에 의해 오염되기 쉬워 광합성 산물의 회수 비용이 커진다는 단점이 있다. 또한, 기존의 광생물반응기 중 판형 광생물반응기는 소용량 고농도 배양에는 유리하지만 대용량의 경우는 반응기 구조가 복잡해 대규모화가 어려운 단점이 있고, 광섬유를 이용한 광생물반응기는 재료가 비싸고 빛전달의 한계성으로 인해 실용화되지 못하고 있으며 교반형 광생물반응기는 대량 배양시 공기부양식에 비해 기계적 교반을 위한 에너지 요구량이 급격히 커지는 단점이 있다.기계적 교반이 필요없이 광합성에 필요한 빛에너지를 보다 효율적으로 배양액 내부에 공급하여 고농도로 광합성 미생물을 대량생산할 수 있게 한다
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2001-05-22
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일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
유성 세포 측정방법을 이용하여 세균 내에 발현된 단백질을 형광 항체를 이용하여 탐색함으로써 세균 세포 내에서 발현된 특정 단백질의 양을 측정하는 방법에 관한 것으로, 이를 이용하면 세포내 단백질이 발현되는 적합한 조건 등을 분석할 수 있다.세균내의 단백질을 측정하는 방법은 우선 세균을 세포벽을 제거하는 효소인 0.1-5mg/ml의 리소자임으로 처리하여 원형질막으로만 이루어진 구형질체를 얻고, 그 구형질체를 1-8%의 파라포름알데히드를 사용하여 고정한 다음, 고정된 세포를 0.05-0.5%의 사포닌으로 처리하여 구형질체의 원형질막을 부분적으로 녹여내고 고분자량의 측정시약이 원형질막을 통과하게 처리하여 유성 세포 측정방법을 이용하는 것이다.
- 보유기관
- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2001-06-05
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일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
살모넬라 균주의 L-아라비노즈(arabinose) 오페론을 이용한 유도성 프로모터하에서 발현되는 융합파트너 PRK(phosphoribulokinase) 및 목적 단백질인 인간 부갑상선 호르몬(human parathyroid hormone: hPTH)의 융합유전자가 포함된 발현벡터로 형질 전환된 재조합 대장균을 초기 배양배지에 접종하여 회분식으로 배양하다가, 용존산소의 양이 급격히 증가할 때부터 유가배지에서 배양하면서 동시에 L-아라비노즈를 첨가하여 단백질의 발현을 유도하는 공정을 포함하는, PRK를 융합파트너로 하는 재조합 hPTH의 대량생산을 위한 DO-stat 유가식 배양방법에 관한 것이다.DO-stat 유가법이란 용존산소량을 발효조내 영양 성분의 고갈 정도의 지표로 삼아 용존산소량이 일정 수준 이상 증가하면 영양 성분을 유가법으로 보충하여 주고, 이후 보충된 영양 성분의 소비와 함께 감소된 용존산소량이 영양 성분의 고갈로 인해 다시 증가하면 영양 성분을 또 다시 보충하여 주는 유가법을 의미한다. 배양액 중 용존 산소량을 측정하여 용존산소가 50% 포화 이상일 때 배지를 주입하고, 50% 이하로 떨어질 때 배지 주입을 중단하는 DO-stat 유가법을 자동으로 조절하여 배양이 끝날 때까지 반복한다. 이러한 DO-stat 유가식 발효방법에 의하면, 세포 성장, 플라즈미드 안정성및 PRK를 융합파트너로 하는 재조합 hPTH의 발현량 모두를 높은 수준으로 안정적으로 유지시키므로, 저렴한 비용으로 재조합 hPTH를 대량 생산하게 된다
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2001-05-31
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일반기술
생명과학 > 미생물자원
대장균의 특성상 세대시간이 짧아 유독성 물질 등에 대한 반응속도가 빠르고, 이 대장균에서 발생되는 생물학적 빛(Bioluminescence)은 루미노미터라는 장치를 통해 쉽게 측정이 가능하기 때문에 이 대장균을 이용하여 강이나 하천 및 상수원으로 유입되는 유독성 화학물질의 독성을 민감하고 신속하게 정량적으로 탐지할 수 있음에 착안하여 개발된 것으로, 바이오 센서는 외부로부터의 빛을 완전히 차단하여 생물학적 빛 (Bioluminescence)의 측정에 방해됨이 없도록 하고, 외부온도 변이를 최소화하기 위하여 검정고무 재질을 이용하였으며 1.5 mL 유리 바이얼에 동결 건조된 세포(cell)를 휴대용 바이오 센서의 내부에 안착하고 격막(septum)을 통해 독성물질이 함유된 시료를 유입하게 되면 독성의 정도에 따라 생물학적 빛을 방출하게 되며, 이는바이얼의 바닥에 부착된 광섬유 막대 (fiber optic probe)를 통해 광도계 (luminometer)에서 측정하게 된다. 이때의 동결건조 세포는 균주의 보존액으로 트레할로즈를 사용하여 액체질소 또는 -70℃에서 급속 냉동시킨 다음, -20℃에서 밀봉 보관시킨 동결건조 균주를 증류수로 재수화시켜 사용한다독성탐지용 균주의 동결건조 방법은 아주 적은 부피로 취급이 용이하고 짧은 시간에 활성화시켜서 탐지반응을 일으키기에 적합하도록 균주를 저장하고 보급할 수 있는 독성탐지용 균주의 동결건조 (Freeze-Drying) 및 보관방법을 제공하여 균주의 장기간 보관과 운송상의 문제점을 해결하였고, 휴대용 바이오센서를 사용한 독성탐지 방법은 현장에서 신속하고 민감하게 독성을 탐지할 수 있으며, 신속한 사후 대책 마련을 가능하게 하여 불시의 사고시에 발생할 생태계의 파손을 최소화 할 수 있도록 한다
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2001-05-31
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일반기술
생명과학 > 미생물자원
혐기성 조건하에서 생장할 수 없으며, 호기상태에서는 포도당을 이용하면서도 유기산을 생산하지 않기 때문에 고농도 배양이 가능한 재조합 단백질 발현의 숙주로 사용될 수 있는 대장균 변이주에 관한 것으로 대장균 변이주 JL1506은 다음과 같이 하여 얻었다.일차로 화학적 돌연변이원을 이용하여 대장균 MG1655를 돌연변이 시킨 후, 혐기적인 상태에서 유기산을 생성하는 과정 각각을 차단한 돌연변이주를 선별하였다. 하지만 이들은 여전히 유기산을 생산하였다. 이는 산소가 부족한 혐기적인 상태에서도 대장균은 생장하며, 생성된 NADH2와 해당과정의 중간산물들이 유기산으로 전환되는 것으로 분석되었다. 따라서 혐기상태에서는 생장하지 못하는 돌연변이 균주를 스크리닝하였으며 이중 하나가 JL1506로써, 호기적 상태에서 포도당으로부터 유기산 생성이 억제되었고, 동시에 야생종에 비하여 생장량의 차이는 없었다. 또한 포도당의 농도가 증가되어도 생장량의 억제가 나타나지 않았다대장균 변이주는 발효 도중에 유기산에 의한 대사저해를 받지 않으므로, 목적 재조합 단백질을 코딩하는 외래 유전자를 도입하여 배양할 때에도 고농도의 탄소원의 존재하에서도 생장 억제 없이 잘 생육할 수 있으며, 목적하는 재조합 단백질을 효율좋게 생산할 수 있게 한다. 그러므로 외래 재조합 단백질을 대량 생산하기 위한 발현 숙주로서 유리하게 사용될 수 있으며 이를 숙주로 사용하여 발현시킬 수 있는 외래 재조합 단백질의 종류에는 특별한 제한이 없으나 대사억제(catabolite repression)에 민감한 프로모터 (예, lac, fac등)에 의해 전사발현 되는 재조합 유전자에 의해 생성되는 재조합 단백질의 발현에 특히 유리하다. 하지만 대사억제에 민감하지 않은 다른 종류의 프로모터에 의한 발현도 상기 민감성 프로모터보다는 낮지만 다른 기존의 대장균 균주에 비해서는 우수한 발현 효과를 나타낸다
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- 특허법인충정
- 등록일
- 2001-05-31
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일반기술
생명과학 > 기타 유전자 공학
글리세롤-3-포스페이트 디하이드로지나제(GPD)유전자를 느타리버섯(Pleurotus sajor-caju) ASI 2070 균주로부터 분리하여 이를 식물 형질전환용 벡터인 pBI에 클로닝한 재조합 벡터를 이용하여 감자에 전이시켜 환경스트레스에 대한 저항성이 부여된 감자를 제조하는 것에 관한 것으로, GPD 유전자를 포함하고 있는 느타리버섯 균주의 총 DNA 와 RNA를 분리하는 단계; 느타리버섯의 cDNA 유전자 은행 작성 및 파지 DNA를 분리하는 단계; GPD 유전자 분리하는 단계; GPD 유전자의 발현을 검정하는 단계;GPD 유전자를 포함한 재조합 pBI 벡터의 제조 및 아그로박테리움에 감염시키는 단계; GPD 유전자의 감자식물체로 형질전환시키는 단계; GPD 유전자의 감자식물체로의 전이를 확인하는 단계; GPD 유전자의 감자식물내에서의 발현을 확인하는 단계; GPD 형질전환 감자식물체를 검정하는 단계로 이루어진다여러가지 환경적 스트레스는 식물의 생육이나 수량에 크게 영향을 미치고 있으며 이를 극복하기 위한 방안으로 식물에서는 Osmoprotectants라고 불리워지는 트레할로스, 만니톨, 베타인 및 프럭탄 등을 생합성 하는 유전자를 전이시켜 이들의 함량을 높여줌으로써 내염, 내한발성을 증진시킨 연구결과가 보고되고 있으나 이들 중 어떤 유전자는 식물에 도입되었을 경우 환경스트레스에 대한 내성을 증진시키기는 하나 식물의 생육에 영향을 미쳐 식물체가 왜소해지거나, 개화가 되지 않는 경우가 발생하는 등의 문제가 있다. 이와 같은 문제에 대한 해결 방안으로 느타리버섯으로부터 Osmotic stress 관련 유전자인 신규한 GPD 유전자를 분리함과 동시에 이 유전자를 함유한 재조합벡터를 이용하여 식물생육에는 영향이 적으면서 환경스트레스 저항성 즉 온도저항특성, 내염 및 내한발성 특성이 크게 개선된 형질전환 감자를 제조하게 되었으며 또한 이 형질전환 감자는 바닷물의 농도와 비슷한 58dSm-1에서도 생육하여 염류집적이 문제가 되는 간척지나 비닐하우스에서도 감자재배가 가능하도록 함으로써 재배지 확대를 통하여 효율적으로 국토를 이용할 수 있도록 한다.GDP 유전자는 식용버섯에서 유래하였기 때문에 식품으로서 유해성이 전혀 없어 매우 유용하다
- 보유기관
- 한국산업은행
- 등록일
- 2001-05-31
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일반기술
생명과학 > 기타 생물자원 보존·생산·이용 기술
키틴질로부터 얻어진 키틴이나 키토산을 효소적 방법, 즉 스트렙토마이세스 속 또는 바실러스 속 기원의 미생물을 이용하여, 1-15개 중합도, 키틴 및 키토산이 모든 pH 영역에서 수용성 물질를 함유하도록 하여 분말, 정제 또는 액상으로 무공해 콩나물, 숙주나물 재배용 첨가제로 사용함으로써, 농약류등의 약품을 사용하지 않고서도 콩이나 녹두 종자의 부패를 방지하고 각종 오염물질의 뿌리흡수나 잔류가 되지 않도록 하여 무공해 나물를 제조할 수 있다. 재배기간을 조절할 수 있고, 유통중의 부패나 건조억제로 신선도를 유지시킬 수 있고, 각종환경 장해에 대한 예방 및 치료효과를 갖는다.종래에는 원가부담을 줄이기 위하여 종자의 발아과정에서 생기는 뿌리의 부패로 인한 손실을 줄이고, 생육불량으로 인한 상품성 저하를 막기 위하여 독성이 강한 각종 농약류를 사용하거나 재배기간을 단축시키기 하여 성장호르몬과 같은 약재를 사용한다.식품의 기능성 신소재로 알려진 키틴질을 정제 분리하여 얻어진 키틴, 키토산을 효소적 방법, 즉 스트렙토마이세스 속(streptomyces SP.)또는 바실러스 속(bacillus SP.)기원의 미생물을 이용하여 분해를 통해 1-15개의 중합도, 모든 pH 영역에서 수용성 물질인 키틴 및 키토산 올리고당을 0.001% 이상 함유하도록 하여 분말, 정제 또는 액상으로 제조하였다. 제조된 첨가제를 녹두나 콩을 발육한 결과 싹이 트기전 또는 나물의 생성과정 중에 부패가 없어지고, 수질이 나쁜 물에서도 성장이 잘 되었고, 생육불량이나 각종 환경장애에 대한 예방 및 치료효과가 탁월했으며, 나물의 생장기간 단축 및 생장기간 조절, 유통 중 뿌리가 마르는 것이 방지되고, 나물뿌리가 연하고 부드러워졌다
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2001-05-31
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생명과학 > 기타 생물자원 보존·생산·이용 기술
분자량이 약 3,000이하인 키토올리고당 또는 키토산올리고당을 함유하고, 분말 또는 액상의 제형으로 유우(乳牛)의 유방염 치료 및 체세포수 저하효과를 갖는 경구투여용 조성물로 키틴, 키토산의 분해물인 저분자량 키토올리고당을 이용함으로서 항생물질을 사용하지 않고도 유방염이 억제되어 젖소의 건강을 유지할 수 있고 콜레스테롤 및 체세포수의 감소로 고품질의 우유 생산이 가능하고, 천연물이므로 안전하고 다량의 첨가가 요구되는 다른 원료에 비하여 0.1% 전후의 낮은 농도에서 효과를 얻을 수 있으며, 단순원료로서 사용이 용이하고, 경제적이다. 키틴질은 아세틸글루코사민아니 글루코사민을 구성 성분으로 하는 물에 불용성인 다당류이며 갑각류, 곤충류, 패류, 균류등의 세포벽이나 외피골격을 구성하는 주성분이다. 생물계에 있어서 연간 1000억톤 가량이 생성되는 섬유소 다음의 지구상에 풍부한 자원으로 알려져 있다. 키틴질의 안전성은 그 분해물인 키토올리고당과 함께 이미 증명되었으며 의학적인 항암 활성이나 혈중 콜레스텔로치의 저하, 고혈압 억제, 혈당 조절, 간지방치의 조절, 면역 활성화 효과 등을 지니고 중합도가 높은 키토올리고당은 응집력이 뛰어나고 항균성과 장내유용균의 생육활성 효과도 지니고 있어 여러 분야에 응용되고 있다최근에는 식품의 기능성 신소재로 알려진 키틴이나 키토산을 사료에 첨가하여 사육한 가축의 콜레스테롤 함량이 5%정도 낮아졌다는 보고는 있으나 면역 기능의 향상에 따른 질병의 예방 목적이나 그에 따른 유우(乳牛)에 있어서의 우유 중의 체세포수의 저하를 위해 키토올리고당이 사용된 예는 아직 보고되지 않았다. 본 기술은 유우 유방염 치료 및 우유 체세포수 저하작용을 갖는 조성물로 약 3,000이하의 키토올리고당은 게, 새우껍질 등에 함유된 키틴질을 조원료의 분쇄, 탈염, 탈단백, 탈색소등의 공정에 의하여 키틴 또는 키토산으로 분리, 정제하고 정제된 키틴 또는 키토산을 분해 효소를 이용하여 분해시켜 제조하여 분말 또는 액상의 제형의 조성물을 우유를 착유하고 있는 젖소를 대상으로 마리당 1일 평균 10g 정도 섭취할 수 있도록 식수에 용해시켜 30일간 공급하고 착유된 우유를 검사하였다. 대조구와의 비교검사 결과 단백질이나 지방함량에 있어서는 유의적 차이가 인정되지 않았으나 유우의 건강 상태가 항생물질의 사용없이도 지속적으로 유방염이 발생하지 않았으며 우유 중의 콜레스테롤치 및 체세포수의 저하에 있어서도 지속적으로 효과가 유지되었다
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- 특허법인충정
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- 2001-05-31
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생명과학 > 기타 생물자원 보존·생산·이용 기술
키토산을 효소적 방법으로 분해시켜 얻은 분자량 10,000이하의 저분자 수용성 키토산 또는 키토올리고당으로된 천연 두부 응고제에 관한 것으로, 기존의 화학적 응고제에 비해 안전성이 높고, 생리학적 및 의학적 작용의 부과와 화학응고제의 제거공정이 필요치 않아 미량의 필수 영양분의 손실도 막을 수 있으며 수침, 응집제 제거과정이 생략되므로 공정이 단순화되고 생산성이 향상된다. 키틴질은 아세틸글루코사민이나 글루코사민을 구성 성분으로하는 물에 불용성인 다당류이며 갑각류, 곤충류, 패류, 균류등의 세포벽이나 외피골격을 구성하는 주성분이다. 생물계에 있어서 연간 1000억톤 가량이생성되는 섬유소 다음의 지구상에 풍부한 자원으로 알려져 있다. 키틴질의 안전성은 그 분해물인 키토올리고당과 함께 이미 증명되고 있다종래 두부의 제조시에 응고제로 사용되던 염화칼슘, 황산칼슘, 글루코노락톤(glucono-δ-lactone)등의 화학응고제 제품은다량의 불순물을 포함하고 있는데, 이들 불순물들이 그 제조공정에서 완전히 제거되지 못하며, 두부 제조공정 중에 이들 미량의 유해물질들이 두부의 단백질과 결합하여 제거되지 않는 문제점이 있다. 최근에는 이러한 단점을 보완하기 위해 글루콘산칼슘을 응고제로 사용하고 있으나 이 역시 화학적 응고제의 일정이다. 또한 천연 응고성 소재로서 키토산이 사용될 수 있으나 이는 고분자로서 다량의 첨가가 요구되고 키토산의 점성때문에 탈수 성형이 제대로 이루어지지 않는 문제가 있다. 천연 두부 응고제는 저분자 키토산 및 키토올리고당의 제조공정에 의해 제조된다. 저분자 키토산 및 키토올리고당은 키토산을 초산, 젖산, 구연산, 사과산, 염산, 아스코프빈산 등의 산에 녹이거나 콜로이달 수용액 상태로 만들어 37℃에서 효소를 첨가하여 키토산을 분해시키고 열처리 및 여과하여 만들어 제조할 수 있다. 본 응고제를 두부에 첨가하여 두부품질를 평가한 결과 연하면서 탄력성을 지닌 두부가 되었다. 또한 화학응집제를 사용한 두부는 화학물질들의 분해로 인한 쓴맛을 내지만 키토올리고당 첨가 두부는 두부의 고소함이 증가하였다. 절단면의 상태와 균질성은 화학응고제를 사용한 두부보다 좋은 것으로 나타났으며, 키토올리고당의 기능성이 강화된 무공해의 천연두부임을 확인 할 수 있었다
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- 특허법인충정
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- 2001-05-31
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생명과학 > 기타 생물자원 보존·생산·이용 기술
키틴이나 키토산을 화학적 또는 효소적 분해를 통해 중합도가 낮은 수용성 저분자 키틴 및 키토산이나 키틴 또는 키토산올리고당을 0.01% 이상 함유하여 분말, 정제 또는 액상으로 제조하여 과수작물, 원예작물, 화훼작물, 잔디 등에생장촉진 및 병충해 방지 목적으로 사용될 수 있다. 키틴질은 N-아세틸-D-글루코스아민이나 D-글루코스아민으로 구성되어있고 갑각류, 곤충류, 패류등의 세포벽이나 외피골격을 구성하고 있는 물질이다. 키틴·키토산의 안전성은 그 분해물인 수용성 저분자 및 올리고당과 함께 이미 증명되었으며 항암효과, 혈중콜레스테롤치 저하, 혈당조절, 고혈압 억제, 간기능향상, 면역활성, 장기능 활성 등의 기능성을 지니고 있어 이미 식품 및 제약분야에까지 응용되고 있다. 수용성 저분자 키틴. 키토산과 키틴 및 키토산 올리고당은 키틴 또는 키토산을 화학적 또는 효소적 처리 방법으로 N-아세틸-D-글루코스아민이나 D-글루코스아민의 중합도가 1 내지 100개 사이가 되도록 분해시킨 것이다종래의 화학비료나 농약은 비정상적으로 생장을 촉진시키고 일시적으로 병충해를 막는 효과는 있었지만 그러한 환경에 적응한 병충해를 막기에는 힘들기 때문에 더 많은 화학비료와 독성이 더욱 강한 농약을 사용하여 환경의 오염이 아닌 환경의 파괴라고까지 표현되고 있다. 이는 식물에 유익한 미생물이나 곤충들까지도 멸종되거나 사라져가고 있어 작물의 재배를 더욱 어렵게 만들고 있다. 또한 토양 중에 축적되는 각종 유해 물질들은 작물에 흡수하여 축적되어 이를 장기섭취하여 중금속 중독이나 농약중독과 같은 사례가 늘고 있어 심각한 문제로 대두되고 있다. 이러한 문제점을 해결하기 위하여 화학농약이나 비료를 대체할 수 있는 무공해 생물농약 등의 연구가 다양하게 이루어지고 있으나 현재까지도 화학 농약이나 화학비료의 사용량은 계속 증가되고 있다.자연의 기능성 신소재로 알려진 키틴 또는 키토산이 동물이나 식물의 면역력을 증강시키는 효과가 있다는 것에 착안하여 천연농약으로서의 효과를 얻을 수 있도록 하기 위하여 키틴질의 분리 정제 공정도와 조 원료의 분쇄, 탈염, 탈단백 및 탈색소 등의 공정에 의하여 키틴, 키토산으로 분리, 정제하고, 화학적처리 또는 효소적 처리를 통해 제조한 키토산을 5ppm이상의 함량으로 희석하여 작물에 살포 및 급수한 결과 비료효과와 농약효과를 동시에 발휘하는 식물의 생장촉진 및 병충해 방지제 효과를 나타내었다
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- 2001-05-31
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생명과학 > 기타 생물자원 보존·생산·이용 기술
키틴이나 키토산을 화학적 또는 효소적으로 분해를 통해 얻은 수용성 저분자인 키틴 및 키토산이나 키틴 및 키토산 올리고당을 함유하여 분말, 정제 또는 액상으로 제조하여 종자처리, 양액첨가, 엽면살포등에 사용함으로서 식물에 바로 흡수될 수 있기 때문에 환경 여건의 영향이 적고 화학비료나 농약과 같이 속효성을 나타낼 수 있으며, 다량의 시비로도 화학비료나 농약과 달리 약해가 일어나지 않으며 상품성 향상 뿐만 아니라 무공해 작물의 재배가 가능하고 다수확의 효과도 얻을 수 있다. 키틴, 키토산의 안전성은 그 분해물인 수용성 저분자 및 올리고당과 함께 이미 증명이 되었고, 항암효과, 혈중콜레스테롤치 저하, 혈당조절, 고혈압 억제, 간기능 향상, 면역활성, 장기능 활성등의 기능성을 지니고 있어 이미 식품 및 제약분야에 까지 응용되고 있다. 수용성 저분자 키틴, 키토산과 키틴 및 키토산 올리고당은 키틴 또는 키토산을 화학적 또는 효소적 처리 방법으로 N-아세틸글루코스아민이나 D-글루코스아민의 중합도가 1 내지 100개 사이가 되도록 분해시킨 것이다화학농약에 의한 병충해 방제는 일시적인 효과는 갖고 있으나 완전 방제가 불가능하고, 기존의 병해나 충해가 농약에 대한 강한 내성과 아울러, 식물은 병을 이겨내기 위한 강한 면역력을 필요치 않게 되어 종자 상태부터 면역력이 약화되어 더 많은 병해와 충해를 입게되는 결과를 초래하게 되었으며 토양이나 식물체의 잔류농약으로 인하여 사람들도 많은 해를 입고 있다. 화학비료의 사용량 또한 계속 증가하여 지금은 토양의 산성화, 유용 토양 미생물의 사멸, 지하수의 오염과 같은 환경의 변화에 있어서 화학비료의 다량사용이 환경오염의 주범이 되고 있다. 이와 같은 문제점을 해결하기 위하여 새로운 기능성 소재로서 고분자 물질인 키틴, 키토산을 작물에 이용한 예는 있으나 고분자 물질은 식물이 바로 흡수할 수 없기 때문에 식물이 직접 흡수할 수 있는 조건의 수용성 저분자 키틴, 키토산 및 올리고당을 수경재배에 사용한 예는 아직 보고되어 있지 않다. 키틴질의 분리, 정제, 조 원료의 분쇄, 탈염, 탈단백 및 탈색소등의 공정에 의하여 키틴, 키토산으로 분리, 정제하고 화학적처리 또는 분해효소를 이용하여 분해시키고, 화학적 처리에 의해 수용성 저분자 및 올리고당을 제조하여 수경재배를 통해 시험한 결과 종자발아가 촉진되고 생장촉진 및 수확량 증대와 병에 대한 내성이 강화되어 곰팡이병, 흑점병, 탄저병 등의 병해가 발생하지 않았으며, 진딧물 등의 해충도 생기지 않았다
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2001-05-31
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일반기술
생명과학 > 기타 생물자원 보존·생산·이용 기술
중합도가 1 내지 100의 범위에 있는 수용성의 저분자량 키토산, 저분자량 키틴, 키토산올리고당 또는 키틴 올리고당을 유효성분으로 함유하는 토지 개량제 조성물에 관한 것으로, 수용성인 저 분자량의 물질을 유효성분으로 함유하기 때문에 토질이 악화된 토양에서도 단기간내에 토지의 특성을 개선할 수 있으며, 토지중에 존재하는 유용 미생물 활동의 활성화, 보수력 증대, 병충해 방지, 식물 부리의 부패 방지, 산도 과다 방지 및 보비력 향상 등의 토질 개량 효과가 있다. 키틴 혹은 키토산을 통틀어 일컫는 용어인 키틴질은 N-아세틸-D-글루코스아민 혹은 D-글루코스아민으로 구성되어 있고, 갑각류, 곤충류, 패류 등의 세포벽이나 외벽골격을 구성하고 있는 물질이다. 또한 키틴과 키토산의 생체내 안전성은 그 분해물인 수용성 저분자 키틴 혹은 키토산, 또는 이들의 올리고당과 함께 이미 증명되고 있다종래 기술은 키토산 용액을 굴껍질가루 용액 또는 인산칼륨 등과 혼합하여 제조한 배합비료가 기재되고 있으나 키토산은 단위체로 이루어진 고분자 물질로서 토양에 존재하는 미생물에 의해 이용되기가 용이하지 않고 식물에 직접 흡수되기 어려운 문제점이 있다. 그러나, 본 기술은 키틴 혹은 키토산을 새우껍질 등과 같은 갑각류의 천연 재료로부터 분리후, 효소분해를 통해 키틴 올리고당을 얻어, 그대로 분말의 형태로 사용하거나, 혹은0.001부피% 이상의 농도로 용해시켜 용액의 형태로 제조하여 통상의 부형제와 혼합해서 정제화시켜 토양에 살포한 결과 재배지에서 생육된 각종 작물들은 당도증가, 수확량 증가, 영양제 사용절감등의 효과를 나타내었다. 이는 유용 토양미생물(특히 방선균)의 번식이 활발해지고, 사상균의 번식이 억제되고, 토양의 보수성, 보비력이 높아지고 pH 변화없이 지력이 높아져서 작물의 생육환경이 좋아졌기 때문이다
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2001-06-04
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일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
포스포리페이즈 D1(PLD1)활성을 저해하는 테트라펩티드 및 이의 선별방법에 관한 것으로 세포내 신호전달 과정은 외부 자극을 수용하여 여러 세포에서 다양한 세포기능을 유발한다.포스포리페이즈 D1 저해 활성을 갖는 새로운 테트라펩티드를 제공하며 합성 테트라펩티드 라이브러리로부터 테트라펩티드를 선별한다PLD1을 특이적으로 저해함으로써 PLD1에 의해 유도되는 세포분열, 세포내 분비 과립의 이동 및 분비, 분화, 세포골격의 변화 등을 효율적으로 조절할 수 있다
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2001-06-01
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일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
사람 단핵구(monocyte)에서 수퍼옥사이드(superoxide)의 발생을 촉진시키는 헥사펩티드(hexameric peptide)에 관한 것으로 단핵구는 생체 면역 시스템의 초기 단계에서 중요한 역할을 한다. 외부에서 박테리아와 같은 미생물이 조직에 침입했을 때 생체 면역 시스템은 대식세포(macrophage), 중성구(neutroghil)와 같은 거식세포들이 직접 박테리아를 거식작용(phagocytosis)을 통해 세포 안으로 받아들여 파고좀(phagosome)에서 여러가지 분해효소를 통해 초기단계에서 제거한다. 또한 단핵구는 미생물의 침입에 대응하여 조직에서 여러 가지 염증반응 결과 생성되는 물질을 거식작용을 통해 제거하는 중요한 역할을 한다. 이때 파고즘과 세포막을 통해 막단백질인 NADPH옥시데이즈에 의해 수퍼옥사이드가 생성되어 박테리아를 죽이는 등의 역할을 수행하게 된다아미노산 서열을 갖는 헥사펩티드로 이루어진 군으로부터 선택된, 수퍼옥사이드의 생성을 촉진하는 헥사펩티드를 제공하며 수퍼옥사이드 생성을 촉진함으로써, 새로운 면역증강제로서 또는 면역세포의 활성화에 수반되는 신호전달 과정을 밝히는데 도구로 사용될 수 있다.
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2001-06-01
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일반기술
생명과학 > 기타 생물자원 보존·생산·이용 기술
(1)β-글루칸을 함유한 곡물류를 미세분말 처리하고, 그 분말에 가수(加水)하여 수용액을 추출하는 제1공정과;(2)추출된 수용액을 가열하여 β-글루카나아제는 불활성시키고 단백질은 응고시킨 다음, 전 분 분해효소를 첨가, 반응시켜 응고된 물질을 제외한 용액을 여과분리하는 제2공정과;(3)여과 분리된 용액에 주정 또는 알코올류를 첨가하여 고형의 β-글루칸을 분리하는 제3공정으로 이루어진 곡물의 β-글루칸 추출기술. 합성 식이섬유를 전량 수입하고 있는 현재의 상황에 대처하기 위해 천연 식이 섬유의 추출에 대한 연구의 일환으로 곡물 알곡에 포함된 천연식이 섬유의 일종인 β-글루칸을 추출하는 방법에 관한 것이다.β-글루칸은 체내 혈중 콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤의 수치를 낮추고 HDL-콜레스테롤의 수치를 높이며, 지방질 소화기능을 저하시키는 유용한 생리활성 물질이다. 본기술에 의하면 설비비가 적게 들면서도 추출효율은 증대된다.
- 보유기관
- 한국산업은행
- 등록일
- 2001-05-18
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